이번 포스터에서는 내피 세포 손상에 대해 알아보도록 하겠습니다.
내피 세포 손상은 현관 내피 세포 정성 유지의 메커니즘의 심현관 질환 및 세포 생존력을 현저하게 증가시켰고 카이소(Kaiso)의 유전자 조절 활성에 기여했습니다. 내피 세포 손상은 산화 스트레스가 내피 세포 기능의 주요한 원인일 뿐 만아니라 항산화 시스템 손상 및 신호 전달을 변화시키며 산화 스트레스 반응에 근본적인 요인이라는것을 암시합니다. 카이소(Kaiso)는 BTB / POZ(광범위한 복합체, 트램트랙, 브릭(brac) / 수두 바이러스 및 징크핑거)에 속하는데, 이는 바이 모달(bi-modal) DNA결합 전사 인자로서 메틸화된 CpG 디 뉴클레오타이드와 TCTCGCGAGA의 카이소(Kaiso)의 DNA 결합 모티프로 보고되었습니다. 또한 DNA 결합시 카이소(Kaiso)는 POZ 도메인을 통해 다른 POZ-ZF 구성원인 Znf131 매개 전사 억제를 억제시킬 수 있습니다. 카이소(Kaiso)는 POZ 도메인을 통해 카이소(Kaiso)의 배아발달과 암에서 역할을 한다고 보고되었습니다. 또한 Xenopus 동족체인 xKaiso의 초기단계에서 생식결함을 일으키는것으로 밝혀졌습니다. 따라서 카이소(Kaiso)는 유잔자 컨텍스트 및 다른 세포에서 전혀 다른 기능을 가질 수 있습니다. 그러나 혈관 내피에서 카이소(Kaiso)의 역할은 매우 애매모호합니다. 인간의 미세 혈관 내피세초 및 HCAEC단층의 상처 경계에서의 카이소(Kaiso)의 역할을 보면 카이소(Kaiso)가 HUVECs와 HMEC-1s에서 스트레스에 의한 세포사멸을 억제할 수 있다는걸 발견했습니다. 추가로 카이소(Kaiso)는 메틸화된 DNA와 BIK의 발현을 조절하는 역할을 했습니다. 카이소(Kaiso)의 mRNA와 단백질이 H2O2에 의해 유도되 카이소(Kaiso)발현의 빠른 상향조절은 세포의 향산화 기능에 압도되어 페소가 사멸이 될 수 있고, 카이소(Kaiso)의 mRNA와 단백질이 급속히 분해될 수 있습니다. 카이소(Kaiso) mRNA ( Kaiso-siRNA1 및 Kaiso-siRNA2)를 개별적으로 감염시켜 카이소(Kaiso)의 발현을 침무시킨 결과 음성 대조군 (NC-siRNA)와 비교하여 현저하게 감소되었음을 확인할 수 있었습니다. 카이소(Kaiso)-siRNA 트랜스 픽션 후 감소된 단백질의 이러한 지연은 감염 후 48시간이 최고점에 달한다는것을 보여줍니다. 48시간동안 세포증식을 CCK8 방법을 사용하여 분석한 결과 HUVEC의 경우 세포증식이 증가한 반면 Kaiso-siRNA의 경우 세포증식이 감소되었습니다. BCL2는 세포사멸을 억제하는 반면에 BAX와 BIK에서는 세포사멸을 촉제하는 결과를 확인할 수 있는데, 이러한 이유는 카이소(Kaiso)의 항암효과로 인한 BCL2,BAX 및 BIK 발현의 조절로인한 것일수도 있다고 추측할 수 있었습니다. 이러한 결과로 내피세포에서 BCL2,BAK 및 BIK전사 조절에서 카이소(Kaiso)가 부분적으로 기인한다는것을 시사합니다. 카이소(Kaiso)가 BCL2, BAK 및 BIK의 발현을 어떻게 조절하는지를 확인하기 위해 HUVEC 및 HMEC-1에서 침전(CHIP)을 수행시켰는데, 카이소(Kaiso)가 BCL2, BAK 및 BIK의 프로모터영역에 특이적으로 결합하여 유전자 발현에 조절기능을 한다는것을 확인할 수 있었습니다. 또한 카이소(Kaiso)는 프로모터 결합 활성에 있어서 DNA methylation의 역할을 평가할 수 있었는데, methylation DNA를 통해 부분적으로 BCL2와 BAX 프로모터에 결합할 수 있습니다. 이러한 연구결과를 통해 BCL2, BAX 프로모터를 분석하여 KBS의 역할을 분석할 수 있었고 BCL2와 BAX프로모터의 위치에서 KBS와 결합함으로써 KBS가 부분적으로 전사 조절에 참여한다는것을 확인 할 수 있습니다.
